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P1584
3M NaAc, pH5.2 (Sterile, DNase free)
【产品简介】
3M NaAc pH5.2 (Sterile, DNase free),即无菌、无DNA酶污染的醋酸钠缓冲液,是一种常用的分子生物学试剂。本产品主要用于DNA的乙醇沉淀中,其原理 是乙醇能夺取DNA周围的水分子,使DNA失水从而易于聚合;同时乙醇也能够消除DNA的水化层,使带负电荷的磷酸基团暴露出来并与醋酸钠缓冲液中的高浓度 钠离子(Na+)结合,从而减少DNA分子之间的同性电荷排斥力而更易于聚合,最终形成DNA钠盐沉淀。在低温环境下,这种促沉淀效应会被加强,因此对于低浓 度DNA或者较难沉淀的小分子量DNA通常宜在-20℃或-70℃等低温条件下沉淀, 以提高沉淀效率。
【货 号】 P1584
【规 格】 100ml
【保存条件】 常温储存
【使用说明】
1、向匀浆后的样品上清中加入1/10体积的3M NaAc pH5.2,再加入2.5倍体积的无水乙醇,混匀。即可进入下一步的离心步骤。(但如果样品的DNA含量很低或者DNA的长度很短,推荐 -20ºC冻存1小时甚至-70ºC冻存过夜,以充分沉淀DNA,然后再进行后续的离心步骤。)
2、4ºC,12,000-14,000g离心5-10分钟,吸走上清。对于DNA量少,DNA长度比较短,得率要求比较高的情况,推荐离心10分钟。
3、4ºC,5,000-12,000g离心10秒,再次吸走残留的上清。
4、加入约200μl 70%乙醇,轻轻弹击管底,使沉淀微浮起以洗涤并去除盐类。4ºC, 12,000-14,000g离心5分钟,小心吸去上清。
5、4ºC,5,000-12,000g离心10秒,小心地吸除残留液体。
6、待看不到明显的残留液体时,用适量TE或水溶解DNA沉淀。
【注意事项】
1、不可过分干燥 DNA 沉淀,否则会极难溶解。如果发现 DNA 沉淀难以溶解,可以在 4ºC 用摇 床缓慢摇动过夜,以溶解 DNA 沉淀。
2、为了您的身体安全及健康,请穿实验服及佩戴一次性手套操作。
3、本产品仅限于科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。