020-3107 8154
产品中心
Bradford蛋白浓度测定试剂盒
P1005
Bradford蛋白浓度测定试剂盒
- 货号： P1005
- 商品名称： Bradford蛋白浓度测定试剂盒
- 规格： 1000次
- 价格： 110
- 产品参数
- 货号： P1005
- 商品名称： Bradford蛋白浓度测定试剂盒
- 规格： 1000次
- 价格： 110
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)
【产品简介】
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)是最常用的两种蛋白浓度检测方法之一。
Bradford法的检测原理是考马斯亮蓝(Coommassie Brilliant Blue)G-250 与蛋白质的碱性和芳香族氨基酸特别是精氨酸(Arginine)在酸性介质中 结合后，溶液转变为蓝色，溶液最大吸收峰从465nm迁移到595nm，颜色的 变化与蛋白质浓度成正比，因此可通过检测595nm处的吸光度对溶液中蛋 白质浓度进行测定。
本试剂盒最小蛋白检测量为0.5ug。
与测定蛋白浓度的其它方法如BCA法和Lowry相比，Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，尤其是还原试剂的影响。样品中β-巯基乙醇(βMercaptoethanol)的浓度可高达1M，二硫苏糖醇(DTT) 的浓度可高达5mM。
但本试剂盒受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS低于 0.01%，Triton X-100低于0.05%，Tween 20、60、80低于0.015%。
【货 号】 P1005
【规 格】 1000次
【保存条件】 4ºC保存，有效期一年。蛋白标准可以-20ºC长期保存。
【使用说明】
1、蛋白标准品的准备
A.原则上蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释，但是为了简便起见，如果蛋白样品所在溶液不含有干扰本试剂盒检测的物质，也可以用0.9%NaCl、PBS或水稀释标准品。蛋白标准(5mg/ml BSA)如果冻存，请 完全融化并混匀后使用。
B.按照下表配制0、0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5mg/ml蛋白标准。
| 编号 | 稀释液体积 | 标准品体积 | 最终浓度 |
| A | 70ul | 5mg/ml BSA 30ul | 1.5mg/ml |
| B | 30ul | 从A管取60ul | 1mg/ml |
| C | 20ul | 从B管取60ul | 0.75mg/ml |
| D | 30ul | 从C管取60ul | 0.5mg/ml |
| E | 60ul | 从D管取60ul | 0.25mg/ml |
| F | 60ul | 从E管取60ul | 0.125mg/ml |
| G | 60ul | 0ul | 0mg/ml |
（注：每次稀释时注意充分混匀。如果有必要可以增加设置0.0625mg/ml的蛋白标准。）
2、蛋白浓度测定
1.取5ul不同浓度蛋白标准加到96孔板的蛋白标准孔中。
2.取5ul样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足5ul，需加标准品稀释液补足到5ul。请注意记录样品体积。
3.各孔加入250ul G250染色液。
4.用酶标仪测定A595，或560~610nm之间的其它波长的吸光度。(注：可以立即测定吸光度，也可以在2小时内测定，2小时内检测数据无显著变化)。
5.根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品中的蛋白浓度。
【注意事项】
1.蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
2.G250 染色液回复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。
3.为了您的身体安全及健康，请穿实验服及佩戴一次性手套操作。
4.本产品仅限于科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
复制产品链接
长按图片保存/分享
询盘
询盘
