发表时间: 2021-08-14 00:00:19
作者: 广州天涯生物技术有限公司
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实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR,qRT-PCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,从而对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR技术是一次DNA定量技术的飞跃,运用该项技术,可以对DNA 、RNA样品进行定量和定性分析。
图1.扩增曲线 图2.溶解曲线
1 DNA或RNA的绝对定量分析:
包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物转基因拷贝数的检测,RNAi基因失活率的检测等。
★ 服务流程:
1.1 根据目的基因设计引物,优化实验条件。
1.2.DNA/RNA的提取
1.3.标准品和标准曲线的建立
1.4.Realtime PCR
2. 基因表达差异分析:
比较经过不同处理的样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等)、特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA 芯片或差显结果的认证。
★ 服务流程:
2.1.根据目的基因设计引物。
2.2. RNA提取
2.3 cDNA合成
2.4 Realtime PCR
★ 客户提供:
1.进行mRNA表达量分析时,如果提供的材料为Total RNA,请寄送足量的并且保证纯度的总RNA(浓度在200 ng/μl以上,体积在20 μl以上,纯度A260/280在1.8-2.0间)。如果目的基因表达量低时,应尽量提供更高浓度的总RNA。
2.如果提供的材料为细胞或组织应保证材料新鲜,动物细胞数为106以上,动物组织为100 mg以上。
★ 我们提供:实验原始数据及实验结果和方法报告单。